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黃曲霉毒素分析方法匯總

發布時間: 2019-03-28  點擊次數: 1269次

一、多功能凈化柱+KRC光化學柱后衍生法

1 簡介

多功能凈化柱是由多種固相復合填料不僅包括大分子物質,更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質,用來吸附各種酯類,葉黃素,化學物質,碳水化合物和蛋白質等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將AFT B1、B2、G1、G2很好的分離出來,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統可以有效的測定AFT B1、B2、G1、G2含量。

2 多功能凈化柱特點:

2.1 多功能凈化柱可以簡化樣品提取、凈化步驟,無需清洗和洗提。

2.2 可以實現多種毒素檢測,有效降低檢測成本;

2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,可以有效提高檢測靈敏度,實現較低的檢測限(AFT B1 0.05ppb);
2.4 光化學衍生操作簡便,無需使用衍生試劑(通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高);
2.5 一步法凈化,回收率高達90%左右。

2.6 廣泛適用于各類農產品:谷物、淀粉、動物飼料、食品、堅果、棉籽等。

3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡介:

3.1 提取樣品:研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合樣品,

高速均質 1 分鐘。
3.2 過濾:將提取的樣品定量濾紙過濾,收集濾液;

3.3 取4-6ml濾液快速通過 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260

3.4 收集過柱溶液,直接用于HPLC檢測,KRC衍生化后直接記錄AFT濃度。

 

二、免疫親和柱+KRC光化學柱后衍生法

1 簡介

Pribofast AFT總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素,從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用,然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統可以有效的測定AFT B1、B2、G1、G2濃度,提高檢測的準確性和靈敏度。

2 免疫親和柱/KRC衍生法特點:

2.1 特異性很強使得樣品凈化效果;

2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速,提高檢測效率高
2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,有效提高檢測靈敏度,實現較低的檢測限 (AFT B1 0.05ppb)。
2.4 衍生化操作方便,光化學衍生化無需使用衍生試劑(通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑,分析成本高,操作麻煩,儀器故障率較高)。

2.5 回收率高,達到90%以上

3 免疫親和柱法操作步驟簡介:

3.1 提取樣品:研磨、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物將樣品

高速混勻 1 分鐘。
3.2 過濾:將提取的樣品濾膜過 玻璃纖維濾紙,
3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進行過柱凈化:經過Pribofast AFT總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化、淋洗、洗脫三步驟,洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測;

3.4 測定:HPLC直接進樣,經色譜柱、KRC光化學柱后衍生化后直接記錄AFT濃度;

三、酶聯免疫法檢測AFT總量

1 采取直接競爭ELISA方法,利用酶標儀測定樣品和標準品的樣本的吸光值計算得到樣品中AFT總量的含量。

2 試劑盒檢測時間:15分鐘+15分鐘

3 檢測限:0.1ppb

4 交叉反應率:

Aflatoxin B1100%
Aflatoxin B280%
Aflatoxin G1101%
Aflatoxin G2100%
AflatoxinM125%

 

關于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數

●Pribofast KRC 柱后光化學衍生器 波長:254 nm
●HPLC-色譜柱: AFT色譜柱150 x 4.6 mm; C-18
●流動相: 甲醇/水  (45/ 55  v / v)
●流量:1.0 mL/min   柱溫: 30 °C
●進樣體積:20μL
●熒光檢測器:λ-激發波長:365 nm    λ-發射波長:440 nm

●液相色譜儀需要配制:PriboLab公司Pribofast  KRC 柱后光化學衍生器,含有1ml反應池,納米燈管254nm

 

關于AFT色譜柱:

產品貨號產品名稱及規格數量
IAC-010-3

Pribofast, Aflatoxins B1, B2, G1, G2  25 columns/pck 3mL, widebore column

AFT總量免疫親和柱3ml,25支/盒

1盒
M226

PriboFast®226  Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

霉菌毒素多功能凈化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮檢測25支/盒

1盒
PriboFast® 260

PriboFast® 260 Multifunctional cleanup column for Aflatoxin and zearalenone

霉菌毒素多功能凈化柱,用于AFT、玉米赤霉烯酮檢測25支/盒

1盒
PR K010-96

Pribofast ELISA Kit (96-well plate/stripes)  for detection of Aflatoxin B1, B2, G1, G2 in food and feed samples

AFT 總量ELISA試劑盒包,96孔

1盒
STD#1081

Standard, Solution of 4 different aflatoxins in acetonitrile B1, G1

AFT B1B2G1G2 混合標樣。1ml裝,4度陰暗保存

也可提供AFT B1B2G1G2 四種單獨的固體裝標準品。

1盒
KRC-25

Photochemical Reactor for Enhanced Detection Aflatoxin B1, B2, G1, G2; Pribofast KRC-25  230V 50 HzUVE 254 nm lamp

Pribofast KRC 光化學柱后衍生反應系統,254nm納米紫外燈

1套
ODS-150HPLC-Column for Aflatoxin Analysis, C18 150 x 4.6 mm  AFT液相色譜柱1根
 

泵流操作架/免疫親和柱操作架,用于免疫親和柱樣品凈化操作

(含氣泵 轉換頭等配件,多用連接頭是選配)

1套

 

 

關于PriboLab & 北京泰樂祺科技有限公司  

作為面向提供霉菌毒素檢測技術解決方案的主要服務商之一,PriboLab憑借強大的研發團隊和霉菌毒素檢測技術的研究,為農業生產、食品加工與糧食、飼料工業等行業提供專業的真菌毒素檢測技術產品與技術服務。北京泰樂祺科技作為 PriboLab在中國的合作伙伴,積極為國內客戶提供的霉菌毒素檢測技術與產品服務,為國內客戶提供適宜的霉菌毒素檢測方案,幫助客戶建立的霉菌毒素項目檢測分析平臺。

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